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浅谈HIV的实验室诊断

时间:2013-05-30 来源:www.aizibingjce.com 作者:防艾在线 【咨询专家】

HIV感染人体后,抗原首先出现在血液中,但其数量很快就会下降,直到发病后期才重新上升。感染几周后出现lgM抗体并很快消失,以后lgG抗体出现并一直存在,所以HIV感染的实验室诊断以抗体检测为主,以病毒及相关抗原检测为辅。

①HIV抗体检测:HIV抗体检测主要是检测gag和env基因编码蛋白的相应抗体,需进行初筛和确认实验。使用最广的初筛实验有酶联免疫吸附试验、颗粒凝集试验和免疫荧光法;对于阳性血清,需采集新标本做确认实验以排除初筛实验中可能表现出来的假阳性,常采用免疫印迹试验;放射免疫沉淀试验由于涉及感染细胞维护和放射活性代谢物使用两方面的问题,所以通常局限在实验研究中使用。确认实验为阳性的才能报告为HIV感染阳性。

②HIV抗原检测:在HIV感染的一定时期,血清中可出现P24抗原,用单克隆和多克隆抗体检测病毒抗原的方法能测出40pg微量蛋白质,它可用于帮助诊断。某些条件下,抗原检测具有特殊价值:HIV早期感染的窗口期,抗体还没有产生;染后期,患者出现症状;监控疾病进程(如P24浓度增加达4倍,则提示患者可能3年内进AAIDS);婴儿HIV感染的早期诊断。血液中存在病毒抗原表明患者临床预后不良,这对选择治疗方案有指导意义。

③病毒的分离培养:细胞培养不是诊断HIV感染的常规实验方法,但可能对区别一些血清学不确定型样本是否感染有一定帮助,同时,细胞培养也是进行病毒种属分类的基础。从样本中分离出病毒是诊断HIV感染最可靠的方法,但灵敏度不高。

④其他检测方法:有多聚酶链反应试验( PCR)和核酸杂交。PCR是目前用于扩增、放大特异性病毒基因的一种最灵敏的技术,它能在淋巴细胞中直接测出HIV前病毒的DNA序列、寡核苷酸的合成、HIV基因组的补充部位,用细菌DNA聚合酶制备多个拷贝,用标记分子探针证实拷贝。这种方法能检测出阳性血清及经外周血培养病毒分离为阴性的患者细胞中的前病毒DNA,近来报道,在阴性血清个体(有阳性血清病人为固定的性伴侣)的细胞中检测到前病毒的DNA,部分人的血清中有nef抗蛋白抗体。

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